S'appuyant sur plus de deux cents ans d'histoire, la Bibliothèque répond en priorité aux besoins d'information et de recherche des membres de l'Assemblée nationale, de leurs collaborateurs, des fonctionnaires parlementaires, des organismes relevant de l'Assemblée nationale, tels le Protecteur du citoyen, le Directeur général des élections, le Vérificateur général et le Commissaire au lobbyisme, ainsi que du Lieutenant gouverneur et des membres de la Tribune de la presse. Bien que cette clientèle prioritaire ait préséance, tous les citoyens peuvent consulter sur place les ressources documentaires de la Bibliothèque ou faire une demande d'emprunt par l'entremise de leur bibliothèque municipale.

La collection est axée sur le droit, la science politique, l'administration publique, l'histoire et l'économie. On y trouve entre autres la majorité des publications gouvernementales québécoises et canadiennes, une vaste sélection de journaux nationaux québécois et quelques journaux nationaux canadiens, des périodiques et des dossiers de presse thématiques. Des livres rares et précieux complètent cette collection. CUBIQ, le Catalogue Unifié des Bibliothèques gouvernementales du Québec, permet la recherche à l'intérieur de celle-ci.

De plus, la Bibliothèque conserve les archives de l'Assemblée nationale et les archives de parlementaires ou d'individus et d'organismes associés à l'histoire, à l'évolution et au fonctionnement des institutions parlementaires et du parlementarisme au Québec. Elle compte également son propre programme de publications.